腺病毒D型探針?lè)晒舛縋CR試劑盒反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human MIP-1β (Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta) ELISA Kit
人調(diào)節(jié)正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human RANTES (Regulated On Activation, Normal T-Cell Expressed and Secreted) ELISA Kit
人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MCP-3 (Monocyte Chemotactic Protein 3) ELISA Kit
人嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF/CCL11)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human ECF/CCL11 (Eosinophil Chemotactic Factor) ELISA Kit
人胸腺激活調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human TARC (Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MIP-3α (Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha) ELISA Kit
人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human SLC (Secondary Lymphoid Tissue Chemokine) ELISA Kit
人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MDC (Macrophage Derived Chemokine) ELISA Kit
人髓樣前體細(xì)胞抑制因子2(MPIF2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) ELISA Kit
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白4α(MIP4α)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human MIP4α (Macrophage Inflammatory Protein 4 Alpha) ELISA Kit
人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子(CTACK)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human CTACK (Cutaneous T-cell Attracting Chemokine) ELISA Kit
人可溶性CD14分子(sCD14)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Human sCD14 (Soluble Cluster of Differentiation14) ELISA Kit
人免疫球蛋白E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Human FcεRII/CD23 (Receptor II for the Fc Region of Immunoglobulin E) ELISA Kit