細(xì)胞的八個問答
1.細(xì)胞生長曲線測定時為什么要做重復(fù)孔？
答：測定細(xì)胞生長曲線細(xì)胞計(jì)數(shù)時選擇 3 個復(fù)孔，每孔分別計(jì)三次，取其平均值，目的是減小操作誤差。
2.為什么繪制的細(xì)胞生長曲線沒有達(dá)到平臺期？
答：可能有以下原因：一是細(xì)胞接種密度過低；二是細(xì)胞培養(yǎng)時間過短；三是細(xì)胞生長狀態(tài)不好，使其不能正常增殖。
3. 如何選擇細(xì)胞接種數(shù)？
答：可根據(jù)細(xì)胞傳代培養(yǎng)過程中接種數(shù)及細(xì)胞生長周期進(jìn)行計(jì)算，細(xì)胞接種數(shù)因細(xì)胞的不同而不同。
4.細(xì)胞計(jì)數(shù)時為什么要用臺盼藍(lán)染色？
答：加入臺盼藍(lán)后，活細(xì)胞不著色，臺盼藍(lán)著色的細(xì)胞呈深藍(lán)色，是不健康或已死亡的細(xì)胞，不能計(jì)數(shù)。
5.問：測定細(xì)胞生長曲線的意義是什么？
答：細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞生長數(shù)的常用方法，也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo)，是培養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。因?yàn)榧?xì)胞太小，無法測單個細(xì)胞的生長狀態(tài)，所以測細(xì)胞群體的生長曲線。
6.細(xì)胞生長曲線測定周期是幾天？
答：一般是一個星期。
7.細(xì)胞生長曲線還有其他方法繪制嗎？
答：當(dāng)然有。我們提到zui多的是直接計(jì)數(shù)的方法，除此以外還有相對計(jì)數(shù)的方法，該類方法首先要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)定細(xì)胞數(shù)和某個變量的函數(shù)關(guān)系，然后我們只需要測定每天這個變量的值便可以計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的方法。
8.為什么細(xì)胞計(jì)數(shù)*天，細(xì)胞數(shù)沒有增加反而減少？
答：一般細(xì)胞傳代后，會有一個生長緩慢的潛伏期，細(xì)胞不增殖，而細(xì)胞會有正常的死亡，故細(xì)胞數(shù)不增加反而減少。