ELISA方法檢飼料原料中的真菌毒素
真菌毒素普遍存在于飼料以及飼料原料中,據(jù)美國(guó)食品和藥物管理局的調(diào)查表明,elisa試劑盒25%的飼料及飼料原料受到霉菌毒素的污染。飼料中真菌毒素影響動(dòng)物的健康和性能,如動(dòng)物對(duì)霉變飼料中養(yǎng)分的利用率顯著下降;因采食霉變飼料而誘發(fā)的多種動(dòng)物疾??;影響飼料適口性;產(chǎn)毒霉菌和致病細(xì)菌等存在的幾率大大提升。飼料中真菌毒素對(duì)動(dòng)物的影響通過(guò)食物鏈傳遞到食品安全,同時(shí)對(duì)人類健康也產(chǎn)生了威脅,所以必須對(duì)飼料及原料中真菌毒素水平進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控。
目前,ELISA方法檢測(cè)真菌毒素是飼料企業(yè)使用zui廣、認(rèn)可度較高的快速篩選法,相對(duì)液相方法,ELISA方法有著快速、穩(wěn)定、簡(jiǎn)便、較低成本等優(yōu)勢(shì)。因此,我司也是采用該方法對(duì)飼料原料的真菌毒素進(jìn)行監(jiān)控。
其實(shí),ELISA方法操作雖然簡(jiǎn)便,但是還是有很多細(xì)節(jié)需要注意,elisa試劑盒這次分享ELISA實(shí)驗(yàn)中的兩個(gè)時(shí)間問(wèn)題。
一是酶聯(lián)偶合物與標(biāo)液/樣品液的混合液從稀釋孔轉(zhuǎn)移的抗體微孔后,孵育15min(以B1試劑盒為例)
正確操作:這個(gè)15min 需要從轉(zhuǎn)移完zui后一個(gè)孔后,開(kāi)始計(jì)時(shí)。
目的:從zui后一個(gè)微孔開(kāi)始計(jì)時(shí),是為了確保所有微孔的孵育時(shí)間達(dá)到15min,保證每一個(gè)微孔足夠的反應(yīng)時(shí)間
二是添加顯色底物后,室溫孵育5min(以B1試劑盒為例)
正確操作:這個(gè)5min需要在*個(gè)抗體微孔中添加顯色底物后,開(kāi)始計(jì)時(shí)。
目的:從*個(gè)微孔開(kāi)始計(jì)時(shí),是因?yàn)槲覀兿乱粋€(gè)步驟添加終止液時(shí),也是同樣的順序,這樣剛剛好能保證所有微孔的反應(yīng)時(shí)間是5min。elisa試劑盒反過(guò)來(lái),如果我們從zui后一個(gè)微孔添加完顯色底物后才計(jì)時(shí),這樣的話前面的微孔的反應(yīng)時(shí)間就會(huì)超過(guò)5min了。