進(jìn)口elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟:
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)),將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板,再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋?有兩個(gè)原因:
1)競爭抑制比較明顯,應(yīng)稀釋競爭物;
2)血清中含有的性腺激素比較低,應(yīng)該濃縮才對。
血清稀釋用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低進(jìn)口elisa試劑盒本底,當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺得用鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競爭還是間接競爭,血清的稀釋倍數(shù)肯定要事先確定,但也不用一點(diǎn)點(diǎn),你做一個(gè)預(yù)試驗(yàn)即可,選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的競爭ELISA中陰性孔OD在1.0,這樣作出來的曲線比較敏感。
S-Allyl-L-Cysteine 25mg S-烯丙基-L-半胱氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 21593-77-1
Salmeterol Related Compound B 10mg 沙美特羅相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 108928-81-0
Salmeterol Xinafoate 150mg 昔美酸沙美特羅標(biāo)準(zhǔn)品 94749-08-3
Salsalate 150mg 雙水楊酸酯標(biāo)準(zhǔn)品 552-94-3
Saquinavir Mesylate 200mg 甲磺酸沙奎拉韋標(biāo)準(zhǔn)品 149845-06-7
Saquinavir Related Compound A 25mg 沙奎拉韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
Scopolamine Hydrobromide 250mg 氫溴酸東莨菪堿標(biāo)準(zhǔn)品 6533-68-2
Scopoletin 20mg 東莨菪內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品 92-61-5
Secobarbital CII 200mg 76-73-3
Selegiline Hydrochloride 200mg 鹽酸司來吉蘭標(biāo)準(zhǔn)品 14611-52-0
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