聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)簡(jiǎn)稱PCR（PolymeraseChainReaction）(又稱：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))PCR是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火（復(fù)性）及適溫延伸等反應(yīng)組成一個(gè)周期，循環(huán)進(jìn)行，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn)。它不僅可用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎(chǔ)研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA，RNA的地方。PCR又稱無細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。

　　1、核酸檢測(cè)是要對(duì)核酸序列進(jìn)行測(cè)序的方法，可以使用核酸分析儀進(jìn)行分析。核酸分析儀包括一個(gè)電泳系統(tǒng)、一個(gè)激光激發(fā)系統(tǒng)、一個(gè)熒光檢測(cè)系統(tǒng)、一臺(tái)電腦圖像、數(shù)據(jù)處理機(jī)及一臺(tái)彩色激光打印機(jī)。采用四種不同的熒光素來代替?zhèn)鹘y(tǒng)的同位素測(cè)序檢測(cè)。這四種互不相關(guān)、具有各自特異的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)約熒光素標(biāo)記的引物。可分別用于雙脫氧法DNA合成的四組反應(yīng)中，反應(yīng)產(chǎn)物可以混合后在凝膠的單條泳道上完成整個(gè)測(cè)序反應(yīng)。2、而PCR，中文譯為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，其實(shí)是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù)，其擴(kuò)增效率之高就象核裂變的“鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”那樣。PCR技術(shù)通過兩個(gè)短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用，可以在3個(gè)小時(shí)內(nèi)把特定的DNA量提高1000萬倍。比如說在“DNA指紋”中我們提到，科學(xué)家們只需要一根頭發(fā)甚至一個(gè)細(xì)胞就可以完成DNA指紋的鑒定工作，這里實(shí)際上就要采用PCR技術(shù)，因?yàn)橐粋€(gè)細(xì)胞中的DNA含量實(shí)在太少了，人們根本不可能檢測(cè)到它的指紋；有了PCR技術(shù)就好辦了，通過PCR技術(shù)把這個(gè)細(xì)胞中的DNA片斷擴(kuò)增1000萬倍，這樣DNA量就足夠作指紋鑒定了。

　　pcr核酸檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)：

　　高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；

　　高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；

　　操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；

　　高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

　　需要注意什么：

　　pcr核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)液請(qǐng)?jiān)诒信渲?，然后置于PCR反應(yīng)儀上進(jìn)行PCR反應(yīng)。這種冷啟動(dòng)法（CoolStartMethod）與熱啟動(dòng)法（HotStartMethod）相結(jié)合，更能有效地減少PCR過程中的非特異性反應(yīng)，增強(qiáng)PCR擴(kuò)增的特異性，能得到良好的PCR結(jié)果。

　　pcr核酸檢測(cè)試劑盒的檢驗(yàn)原理

　　本試劑盒基于熒光PCR的原理結(jié)合一步RT-PCR以及Taqman熒光探針技術(shù)，采用四色熒光PCR在全封閉的擴(kuò)增體系中檢測(cè)腸道病毒EV,EV71和CA16的特異性基因片段，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的多重快速檢測(cè)。同時(shí)在體系中檢測(cè)內(nèi)參基因，對(duì)待測(cè)樣本的RNA提取及擴(kuò)增進(jìn)行全程監(jiān)控，可以防止假陰性的出現(xiàn)。

　　本試劑盒采用磁珠離心法進(jìn)行核酸純化，在高鹽離子濃度下，基于磁珠表面修飾基團(tuán)與核酸的特異結(jié)合原理進(jìn)行總核酸的吸附分離，后穩(wěn)定的回收核酸進(jìn)行后續(xù)PCR擴(kuò)增。