PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測并記錄其熒光信號(hào)，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價(jià)格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會(huì)影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會(huì)影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識(shí)別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計(jì)和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。

?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計(jì)合成一個(gè)能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個(gè)基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時(shí)，引物與該探針同時(shí)結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時(shí)，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計(jì)算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計(jì)難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
肌鈣蛋白T()檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　平田頭菇3-1　500g

分泌跨膜蛋白1(SECTM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　鐮雄腐霉　1g

肥大細(xì)胞類糜蛋白酶1(CMA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　米根霉　25g

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3(WNT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　白地霉　5g

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員2(WNT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黃發(fā)鏈霉菌　100g

無翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員1(WNT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　極細(xì)枝孢　25g

序列相似家族5成員C(FAM5C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　耐輻射奇球菌　5g

白三烯A4水解酶(LTA4H)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　交替紅色桿菌屬　1g

芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子樣蛋白(ARNTL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　柱孢菌屬　250mg

核受體亞家族1D組成員2(NR1D2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　小棱盤菌　1g

粘蛋白4(MUC4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　多主葡萄殼菌　250mg

皮質(zhì)醇結(jié)合球蛋白(CBG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　97%　溶淀粉類芽孢桿菌　5mg

防御素α1(DEFα1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　油菜菌核病菌　1g

四旋蛋白30(TSPAN30)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　乳白耙菌　25g

細(xì)胞色素P450家族成員1A1(CYP1A1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　大腸埃希菌　5g

雌激素受體相關(guān)受體α(ERRα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　東方伊薩酵母　100g

極低密度脂蛋白受體(VLDLR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　99%　貝酵母　25g

淀粉樣前體蛋白(APP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　98%　黑曲霉　1g
巴西副球孢子菌探針法熒光PCR檢測試劑盒胎盤催素1/2抗體Goat Bovine IgG  羊抗牛IgG          （親和層析純化）100 ul

酪氨酸激酶C-SRC抗體Goat Mouse IgG  羊抗IgG        （免疫親和層析純化）100µl

酸化酪氨酸激酶C-SRC抗體Goat Mouse IgM  羊抗IgM        （親和層析純化）100 ul

酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗體Goat rat IgG  羊抗IgG        （親和層析純化）100 ul

半胱氨酸延伸蛋白α抗體Goat Guinea IgG  羊抗豚鼠IgG        （親和層析純化）20 ul

磺基轉(zhuǎn)移酶CSPS抗體Goat rabbit IgG  羊抗兔IgG           (親和層析純化)100 ul

富含半胱氨酸蛋白2抗體Goat Chicken IgG  羊抗雞IgG          （親和層析純化）100 ul

軟骨酸性蛋白1抗體Goat HSA  羊抗血清白蛋白   （親和層析純化）100 ul

富含半胱氨酸蛋白結(jié)合蛋白抗體Goat human Fibrinogen  羊抗纖維蛋白原   （親和層析純化）100µl