熒光染料的優(yōu)點：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進行識別，進而通過PCR引物的設計和反應條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎也的Real-time qPCR實驗手段。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

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熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標記熒光基團，3'端標記淬滅基團。
正常情況下兩個基團的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當擴增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應體系中的熒光強度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴增結(jié)合的問題，反應結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實驗時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點：
成本高；
設計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
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熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應的進行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強度信號，這樣我們就可以通過熒光強度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線圖。
一般而言，熒光擴增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進行定量分析。為了定量和比較的方便，在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
達非那新DNA-PKcs Antibody溴

達非那新(標準品)DNA-PKcs Antibody5-甲氧基-2-(甲氧基-3,5-二甲基-2-吡啶基)甲基硫代-1H-并咪唑

羅布麻寧；夾竹桃麻素(標準品)TrkB (80E3) Rabbit mAb亞培南(一水物)

羅布麻寧；夾竹桃麻素TrkB (80E3) Rabbit mAb亞酸二乙酯

虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆苷Doublecortin Antibody氧雜環(huán)丁-

虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆苷(標準品)Phospho-Doublecortin (Ser297) Antibody乙酸鈷

十八烷,1-十八(標準品)TrkB Antibody乙酸肼

十八烷,1-十八TrkB (80G2) Rabbit mAb乙基酸頻哪酯

Ruxolitinib (INCB018424)UNC1999乙基三氯硅烷

MK-1775,MK1775 MAML1 Antibody2-乙氧基乙

PD184352 (CI-1040)Dysbindin Antibody異基二酸二乙酯

2-脫氧-D-葡萄糖CTMP Antibody銀

坎地沙坦MPC2 (D4I7G) Rabbit mAb扎西他濱

Ruxolitinib(INCB018424) phosphaMAML2 Antibody1,5-二羥基萘

SB1317,TG02Sox9 (D8G8H) Rabbit mAb (PE Conjuga)芐氧基

阿齊沙坦Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) (C35G9) Rabbit mAb維生素 B2

阿齊沙坦(標準品)Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) (C35G9) Rabbit mAbN-Boc-氨基基溴

伊維菌素(標準品)Histone H3 (D2B12) XP® Rabbit mAb (ChIP Formulad)溴-2-氟
馬腺病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒植物花生四酸(AA)ELISA試劑盒AGEs/FITC  熒光素標記晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體IgG100 ul

植物過氧化氫酶2(CAT2/CAT)ELISA試劑盒AGER/RAGE/Cy3  熒光素Cy3標記晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體IgG100 ul

植物鈣調(diào)素(CaM)ELISA試劑盒Aggrecan/FITC  熒光素標記軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗體IgG20 ul

植物L-抗壞血酸過氧化物酶3,過氧化物酶病(APX3)ELISA試劑盒Aggrecan2/ADAMTS-5/FITC  熒光素標記軟骨蛋白聚糖抗體IgG300 ul

植物L-抗壞血酸過氧化物酶2,細胞質(zhì)(APX2)ELISA試劑盒Agrin/FITC  熒光素標記聚集蛋白抗體IgG100 ul

植物1,5-二酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)ELISA試劑盒Agtr1/AT1a/FITC  熒光素標記血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗體IgG100 ul

植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[銅鋅]2,葉綠體(CSD2)ELISA試劑盒AGER/Gold  金離子標記的晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體20 ul

植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[銅鋅]1(CSD1)ELISA試劑盒Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC  熒光素標記芳香烴受體抗體IgG100 ul

植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[鐵],葉綠體(SODB)ELISA試劑盒Aryl Hydrocarbon Receptor/FITC  熒光素標記芳香烴受體抗體IgG20 ul
PCR技術(shù)的定量原理：
擴增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應擴增過程進行了實時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應的進行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴增曲線。熒光擴增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴增早期，擴增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應不再以指數(shù)形式生成模板，從而進入“平臺期”。在該時期，擴增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。