保存條件: 僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法 1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。 2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。 3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。 4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。 5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 產(chǎn)品名稱:茹拉巴德古柏線蟲PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 英文名稱:Cooperia surnabadaPCR 編號(hào):HE30848-R 類別:PCR檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。 ? 產(chǎn)品僅用于科研注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。 反應(yīng)五要素: 參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則: ①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。 ②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。 ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 ④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。 ⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。 ⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。 技術(shù)原理: DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。 在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性) 產(chǎn)品僅用于科研發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。 儲(chǔ)需要自備的器材: 1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。 2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。 特點(diǎn): 1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。 2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。 3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。 4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。 L-胱氨酸二甲酯/(H-Cys-OMe)2•2HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽/H-Glu(OMe)-OMe.HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98% 包裝;25g L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽/H-Glu(OEt)-OEt•HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;5g L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽/H-Ile-OMe.HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 包裝;1g L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽/L-亮氨酸甲脂鹽酸鹽/鹽酸-L-白氨酸甲酯/L-白亮氨酸甲酯鹽酸鹽/H-Leu-Ome•HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;25g L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽/L-賴氨酸甲酯/H-Lys-OMe.2HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g L-賴氨酸乙酯/H-Lys-OEt•2HCl 質(zhì)量規(guī)格:BR,>97% 包裝;1g L-甲硫氨酸乙酯鹽酸鹽/L-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽/L-Methionine ethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;5g L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽/L-苯基丙氨酸甲酯鹽酸鹽/H-Phe-OMe•HCl 質(zhì)量規(guī)格:BR 包裝;100g L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽/L-苯基丙氨酸乙酯鹽酸鹽/H-Phe-OEt.HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥90%,BR 包裝;25g L-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽/(S)-(+)-2-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽/L-α-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽/L-苯基甘氨酸甲酯鹽酸鹽/L-Phenylglycine methyl ester•HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;500g L-苯甘氨酸乙酯鹽酸鹽/(R)-α-氨基乙酯氫氯化物/L-phenylglycine ethyl ester•HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;5g L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽/L-卟啉甲酯鹽酸鹽/吡咯烷-2-碳酸甲酯鹽酸鹽/H-Pro-OMe•HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 包裝;1g L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽/H-Pro-OBzl•HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 包裝;5g L-羥脯氨酸甲酯鹽酸鹽/反式-4-羥基-L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽/(2S,4R)-4-羥基-L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽/H-Hyp-OMe•HCl 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR 包裝;1g L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽/H-Thr-OMe•HCl 質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/mg,進(jìn)分 包裝;250mg L-色氨酸甲酯鹽酸鹽/H-Trp-OMe•HCl 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 包裝;1g 茹拉巴德古柏線蟲PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格 Pseudomonas│tolaasii 中文名稱:托拉氏假單孢菌種屬:Pseudomonas│tolaasii提供形式:凍干物安全等級(jí):4模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Paenibacillus│amylolyticus 中文名稱:解淀粉類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│amylolyticus分離基物:腐殖質(zhì)樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:纖維素降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% Stenotrophomonas│sp. 中文名稱:寡養(yǎng)單胞菌種屬:Stenotrophomonas│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中添加100mg/L的甲萘威,降解率達(dá)30%。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% Pantoea│sp. 中文名稱:泛菌種屬:Pantoea│sp.分離基物:市售產(chǎn)體表提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:在無機(jī)鹽培養(yǎng)基:中以5mg/l的孔雀石綠為碳源,與1/6LB共代謝培養(yǎng),2天內(nèi)孔雀石綠降解率大于70%培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;定期移植法 純度:98% Aeromicrobium│sp. 中文名稱:氣微菌種屬:Aeromicrobium│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:檢測(cè)、培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30-37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97% Ralstonia solanacearum 中文名稱:茄科雷爾氏菌種屬:Ralstonia solanacearum分離基物:辣椒提供形式:凍干管,斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:辣椒品種抗性平鑒定培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2傳代方法①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基:充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長(zhǎng)條件:30℃生長(zhǎng)特性大小范圍為1.13~1.66×0.57~0.76μm,有1~4根極鞭;在LB平板上,菌落為乳白色不規(guī)則形或近圓形;在TTC平板上,菌落為不規(guī)則形或近圓形,隆起,中間粉紅色四周白色。存儲(chǔ)條件:2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個(gè)月。 純度:97% Streptococcus│equi subsp. Zooepidemicus 中文名稱:馬鏈球菌獸瘟亞種(馬鏈球菌動(dòng)物傳染病亞種)種屬:Streptococcus│equi subsp. Zooepidemicus分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:37℃存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法 純度:97% Bacillus│psychrosaccharolyticus 中文名稱:冷解糖芽孢桿菌種屬:Bacillus│psychrosaccharolyticus分離基物:土壤樣品提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長(zhǎng)條件:20℃存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:98% |